eifcЭпизоотология Иммунобиология Фармакология СанитарияEpizootology Immunobiology Pharmacology Sanitation2224-168XИнститут экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского10.47612/2224-168X-2021-2-12-17eifc-100Research ArticleЭПИЗООТОЛОГИЯEPIZOOTOLOGYВыделение ротавируса от больного теленка и оптимизация параметров его культивированияIsolation of rotavirus from a sick calf and optimization of its cultivation parametersЗгировскаяА. А.ZgirovskayaA. A.

кандидат биологических наук

г. Минск

ТяпшаЮ. И.TyapshaYu. I.

кандидат ветеринарных наук, доцент

г. Минск

ДубаневичО. В.DubanevichO. V.

старший научный сотрудник

г. Минск

ЗуйкевичТ. А.ZuykevichT. A.

кандидат сельскохозяйственных наук

г. Минск

КостюкН. И.KostyukN. I.

кандидат ветеринарных наук

г. Минск

ГерасименкоВ. И.GerasimenkoV. I.

ведущий технолог

г. Минск

РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского»Belarus202106022022021217Copyright © Згировская А.А., Тяпша Ю.И., Дубаневич О.В., Зуйкевич Т.А., Костюк Н.И., Герасименко В.И., 20222022Згировская А.А., Тяпша Ю.И., Дубаневич О.В., Зуйкевич Т.А., Костюк Н.И., Герасименко В.И.Zgirovskaya A.A., Tyapsha Y.I., Dubanevich O.V., Zuykevich T.A., Kostyuk N.I., Gerasimenko V.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://eifc.belal.by/jour/article/view/100

Статья посвящена выделению ротавируса от больного теленка и оптимизации параметров его культивирования в перевиваемых линиях гомологичных и гетерологичных культур клеток. Выделен изолят ротавируса в культуре клеток MDBK из фекалий больного теленка, что подтверждено в полимеразной цепной реакции и реакции нейтрализации. Отработан способ культивирования выделенного изолята в гомологичной (MDBK) и гетерологичной (СПЭВ) культуре клеток. Культивирование ротавируса в щелочной среде и обработка его трипсином в концентрации 20 мкг/мл и внесение трипсина в поддерживающую среду (15 мкг/мл) приводили к увеличению титра вируса до 8,0–8,25 lg ТЦД50/мл.

Установлено, что накопление выделенного ротавируса в роллерах приводило к увеличению выхода вируса и повышению его титра до 8,5 lg ТЦД50/мл. Выделенный изолят ротавируса обладает антигенными свойствами и приводит к формированию иммунного ответа при внутримышечном введении кроликам.

The article is devoted to the isolation of rotavirus from a sick calf and optimization of its cultivation parameters in the transplanted lines of homologous and heterologous cell cultures. Rotavirus isolate was isolated in MDBK cell culture, which was confirmed in polymerase chain reaction and neutralization reaction, from the faeces of a sick calf. A method of culturing the isolated isolate in homologous (MDBK) and heterologous (SPEV) cell culture has been worked out. The cultivation of rotavirus in an alkaline medium and its treatment with trypsin at a concentration of 20 mcg/ml and the introduction of trypsin into a supportive medium (15 mcg/ml) led to an increase in the titer of the virus to 8.0–8.25 lg TCD50/ml. It was found that the accumulation of isolated rotavirus in the rollers led to an increase in the yield of the virus and an increase in its titer to 8.5 lg TCD50/ml. The isolated rotavirus isolate has antigenic properties and leads to the formation of an immune response when administered intramuscularly to rabbits.

выделениеротавирускультура клетокпитательная средаочистка и концентрация вирусаisolationrotaviruscell culturenutrient mediumpurification and concentration of the virusReferencesВыделение и характериатика изолятов ротавируса крупного рогатого скота / Г. С. Скитович [и др.] // Научные основы в области охраны здоровья животных / ФГУ «ВНИИЗЖ» // Ветеринарная патология. – 2006. – № 4. – С. 170–172.Выделение и характериатика изолятов ротавируса крупного рогатого скота / Г. С. Скитович [и др.] // Научные основы в области охраны здоровья животных / ФГУ «ВНИИЗЖ» // Ветеринарная патология. – 2006. – № 4. – С. 170–172.Дороненкова, Г. Н. Выделение ротавируса крупного рогатого скота / Г. Н. Дороненкова, С. А. Чупин, А. М. Тимин // Биотехнология. – 2004. – № 4. – С. 47–52.Дороненкова, Г. Н. Выделение ротавируса крупного рогатого скота / Г. Н. Дороненкова, С. А. Чупин, А. М. Тимин // Биотехнология. – 2004. – № 4. – С. 47–52.Повышение репродукции ротавируса крупного рогатого скота штамм 101 в перевиваемой культуре клеток / О. Н. Окулова [и др.] // Труды федерального центра охраны здоровья животных. – Владимир, 2005. – Т. 3. – С. 194–202.Повышение репродукции ротавируса крупного рогатого скота штамм 101 в перевиваемой культуре клеток / О. Н. Окулова [и др.] // Труды федерального центра охраны здоровья животных. – Владимир, 2005. – Т. 3. – С. 194–202.Рамишвили, Л. Г. Серийное пассирование ротавируса крупного рогатого скота в гетерологичной культуре клеток / Л. Г. Рамишвили, Г. Г. Рухадзе, Е. А. Непоклонов // Вопросы вирусологии. – 1991. – № 6. – С. 521–523.Рамишвили, Л. Г. Серийное пассирование ротавируса крупного рогатого скота в гетерологичной культуре клеток / Л. Г. Рамишвили, Г. Г. Рухадзе, Е. А. Непоклонов // Вопросы вирусологии. – 1991. – № 6. – С. 521–523.Сергеев, В. А. Ротавирусы. Вирусы и вирусные инфекции / В. А. Сергеев, Е. А. Непоклонов, Т. И. Алипер. – М. : Библионика, 2007. – С. 365–369.Сергеев, В. А. Ротавирусы. Вирусы и вирусные инфекции / В. А. Сергеев, Е. А. Непоклонов, Т. И. Алипер. – М. : Библионика, 2007. – С. 365–369.Clark, B. Tripsin enhancement of rotavirus infectivity mechanisms of enhancement / B. Clark, J. R. Roth, M. L. Clark // J. Virol. – 1981. – V. 39. – P. 816–822.Clark, B. Tripsin enhancement of rotavirus infectivity mechanisms of enhancement / B. Clark, J. R. Roth, M. L. Clark // J. Virol. – 1981. – V. 39. – P. 816–822.Cell culture propogation of rotaviruses / L. J. Saif [et al.] // Tissue culture methods. – 1988. – V. 11, № 3. – P. 152–153.Cell culture propogation of rotaviruses / L. J. Saif [et al.] // Tissue culture methods. – 1988. – V. 11, № 3. – P. 152–153.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.