eifcЭпизоотология Иммунобиология Фармакология СанитарияEpizootology Immunobiology Pharmacology Sanitation2224-168XИнститут экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесскогоeifc-192Research ArticleИММУНОБИОЛОГИЯIMMUNOBIOLOGYПодбор праймеров и оптимизация мультиплексной ПЦР для выявления Moraxella bovis и Moraxella bovoculiPrimer selection and multiplex PCR optimization for Moraxella bovis and Moraxella bovoculi detectionКрасочкоП. П.KrasochkoP. P.

Красочко П.П., доктор биологических наук, доцент

г. Витебск

КрасочкоВ. П.KrasochkoV. P.

Красочко В.П., кандидат ветеринарных наук

г. Витебск

ЗубовскаяИ. В.ZubovskayaI. V.

Зубовская И.В., кандидат ветеринарных наук, доцент

г. Минск

ЧерноковА. И.ChernokovA. I.

Черноков А.И., аспирант

г. Витебск

УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины»BelarusРУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. ВышелесскогоRussian Federation202529122025022328Copyright © Красочко П.П., Красочко В.П., Зубовская И.В., Черноков А.И., 20252025Красочко П.П., Красочко В.П., Зубовская И.В., Черноков А.И.Krasochko P.P., Krasochko V.P., Zubovskaya I.V., Chernokov A.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://eifc.belal.by/jour/article/view/192

Разработан мультиплексный метод ПЦР в режиме реального времени для одновременной детекции и дифференциации возбудителей инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота – Moraxella bovis и Moraxella bovoculi. Метод основан на использовании оригинальных праймеров и зондов к консервативным генам цитотоксинов MbxA и MbvA, что обеспечивает его высокую специфичность. Проведенная оптимизация показала чувствительность метода 3,8×10³ КОЕ/мл для M. bovis и 6,5×10³ КОЕ/мл для M. bovoculi, что позволяет эффективно выявлять как моно-, так и микст-инфекцию в клиническом материале.

A multiplex real-time PCR method has been developed for the simultaneous detection and differentiation of infectious agents of bovine keratoconjunctivitis - Moraxella bovis and Moraxella bovoculi. The method is based on the use of original primers and probes to the conserved genes of cytotoxins MbxA and MbvA, which ensures its high specificity. The optimization showed a sensitivity of 3,8×10³ CFU/mL for M. bovis and 6,5×10³ CFU/mL for M. bovoculi, which allows effective detection of both mono- and mixed-infection in clinical material.

инфекционный кератоконъюнктивиткрупный рогатый скотMoraxella bovisMoraxella bovoculiПЦРпраймерыдиагностикаinfectious keratoconjunctivitiscattleMoraxella bovisMoraxella bovoculiPCRprimersdiagnosticsReferencesБактерии рода Moraxella – возбудители инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота / Г. Н. Спиридонов, Л. Ш. Дуплева, А. Ф. Махмутов [и др.] // Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки продукции сельского хозяйства : материалы Междунар. науч.-практ. конф., Йошкар-Ола, 20–21 марта 2025 г. – Йошкар-Ола : Марийский государственный университет, 2025. – С. 662–665. – EDN RTHHDR.Бактерии рода Moraxella – возбудители инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота / Г. Н. Спиридонов, Л. Ш. Дуплева, А. Ф. Махмутов [и др.] // Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки продукции сельского хозяйства : материалы Междунар. науч.-практ. конф., Йошкар-Ола, 20–21 марта 2025 г. – Йошкар-Ола : Марийский государственный университет, 2025. – С. 662–665. – EDN RTHHDR.Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота в хозяйствах Республики Беларусь / М. А. Ананчиков, О. Н. Новикова, И. В. Зубовская [и др.] // Эпизоотология Иммунобиология Фармакология Санитария. – 2025. – № 1. – С. 21–25. – EDN JOVBJA.Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота в хозяйствах Республики Беларусь / М. А. Ананчиков, О. Н. Новикова, И. В. Зубовская [и др.] // Эпизоотология Иммунобиология Фармакология Санитария. – 2025. – № 1. – С. 21–25. – EDN JOVBJA.Коба, И. С. Оценка терапевтической эффективности лекарственного препарата Тулатрин при инфекционном кератоконъюнктивите у крупного рогатого скота / И. С. Коба, Ю. В. Козлов, Д. Г. Решетникова // Ветеринария и кормление. – 2022. – № 3. – С. 48–50. – DOI 10.30917/ATTVK-1814-9588-2022-3-12. – EDN ECWWZB.Коба, И. С. Оценка терапевтической эффективности лекарственного препарата Тулатрин при инфекционном кератоконъюнктивите у крупного рогатого скота / И. С. Коба, Ю. В. Козлов, Д. Г. Решетникова // Ветеринария и кормление. – 2022. – № 3. – С. 48–50. – DOI 10.30917/ATTVK-1814-9588-2022-3-12. – EDN ECWWZB.Красочко, В. П. Идентификация бактерий рода Моракселла / В. П. Красочко // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и болезней пчел в современных условиях : материалы Междунар. науч.-практ. конф., посвященной 95-летию со дня рождения доктора ветеринарных наук, профессора Смирновой Нины Ивановны и Дню белорусской науки, Витебск, 07–08 декабря 2023 г. – Витебск : Учреждение образования «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины», 2024. – С. 103–105. – EDN UDOSLS.Красочко, В. П. Идентификация бактерий рода Моракселла / В. П. Красочко // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и болезней пчел в современных условиях : материалы Междунар. науч.-практ. конф., посвященной 95-летию со дня рождения доктора ветеринарных наук, профессора Смирновой Нины Ивановны и Дню белорусской науки, Витебск, 07–08 декабря 2023 г. – Витебск : Учреждение образования «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины», 2024. – С. 103–105. – EDN UDOSLS.Красочко, В. П. Роль бактерий рода Моракселла при инфекционном кератоконъюнктивите / В. П. Красочко // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и болезней пчел в современных условиях : материалы Междунар. науч.-практ. конф., посвященной 95-летию со дня рождения доктора ветеринарных наук, профессора Смирновой Нины Ивановны и Дню белорусской науки, Витебск, 07–08 декабря 2023 г. – Витебск : Учреждение образования «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины», 2024. – С. 101–102. – EDN AAAUJS.Красочко, В. П. Роль бактерий рода Моракселла при инфекционном кератоконъюнктивите / В. П. Красочко // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и болезней пчел в современных условиях : материалы Междунар. науч.-практ. конф., посвященной 95-летию со дня рождения доктора ветеринарных наук, профессора Смирновой Нины Ивановны и Дню белорусской науки, Витебск, 07–08 декабря 2023 г. – Витебск : Учреждение образования «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины», 2024. – С. 101–102. – EDN AAAUJS.Тучков, Н. С. Эпизоотические культуры Moraxella bovis, их биологические свойства и вирулентность выделенных культур для телят / Н. С. Тучков, В. Н. Карайченцев, Н. П. Зуев // Молодые ученые – науке и практике АПК : Материалы Междунар. науч.-практ. конф. аспирантов и молодых ученых, Витебск, 25–26 апреля 2024 г. – Витебск : Учреждение образования «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины», 2024. – С. 484–487. – EDN ZCHFVN.Тучков, Н. С. Эпизоотические культуры Moraxella bovis, их биологические свойства и вирулентность выделенных культур для телят / Н. С. Тучков, В. Н. Карайченцев, Н. П. Зуев // Молодые ученые – науке и практике АПК : Материалы Междунар. науч.-практ. конф. аспирантов и молодых ученых, Витебск, 25–26 апреля 2024 г. – Витебск : Учреждение образования «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины», 2024. – С. 484–487. – EDN ZCHFVN.Этиология и клинико-эпизоотологические аспекты инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота / Г. Н. Спиридонов, Л. Ш. Дуплева, А. С. Зарипов, И. Т. Хусаинов // Ученые записки Учреждения образования «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины». – 2018. – Т. 54, № 4. – С. 133–137. – EDN YUNYQX.Этиология и клинико-эпизоотологические аспекты инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота / Г. Н. Спиридонов, Л. Ш. Дуплева, А. С. Зарипов, И. Т. Хусаинов // Ученые записки Учреждения образования «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины». – 2018. – Т. 54, № 4. – С. 133–137. – EDN YUNYQX.Этиология, способы профилактики и лечения при инфекционном кератоконъюнктивите крупного рогатого скота / С. Н. Семенов, А. Н. Лопанов, В. Н. Карайченцев [и др.] // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. – 2024. – № 6 (236). – С. 55–60. – DOI 10.53083/1996-4277-2024-236-6-55-60. – EDN IBNHWT.Этиология, способы профилактики и лечения при инфекционном кератоконъюнктивите крупного рогатого скота / С. Н. Семенов, А. Н. Лопанов, В. Н. Карайченцев [и др.] // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. – 2024. – № 6 (236). – С. 55–60. – DOI 10.53083/1996-4277-2024-236-6-55-60. – EDN IBNHWT.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.