Выделение ротавируса от больного теленка и оптимизация параметров его культивирования

Статья посвящена выделению ротавируса от больного теленка и оптимизации параметров его культивирования в перевиваемых линиях гомологичных и гетерологичных культур клеток. Выделен изолят ротавируса в культуре клеток MDBK из фекалий больного теленка, что подтверждено в полимеразной цепной реакции и реакции нейтрализации. Отработан способ культивирования выделенного изолята в гомологичной (MDBK) и гетерологичной (СПЭВ) культуре клеток. Культивирование ротавируса в щелочной среде и обработка его трипсином в концентрации 20 мкг/мл и внесение трипсина в поддерживающую среду (15 мкг/мл) приводили к увеличению титра вируса до 8,0–8,25 lg ТЦД50/мл.

Установлено, что накопление выделенного ротавируса в роллерах приводило к увеличению выхода вируса и повышению его титра до 8,5 lg ТЦД50/мл. Выделенный изолят ротавируса обладает антигенными свойствами и приводит к формированию иммунного ответа при внутримышечном введении кроликам.

1. Выделение и характериатика изолятов ротавируса крупного рогатого скота / Г. С. Скитович [и др.] // Научные основы в области охраны здоровья животных / ФГУ «ВНИИЗЖ» // Ветеринарная патология. – 2006. – № 4. – С. 170–172.

2. Дороненкова, Г. Н. Выделение ротавируса крупного рогатого скота / Г. Н. Дороненкова, С. А. Чупин, А. М. Тимин // Биотехнология. – 2004. – № 4. – С. 47–52.

3. Повышение репродукции ротавируса крупного рогатого скота штамм 101 в перевиваемой культуре клеток / О. Н. Окулова [и др.] // Труды федерального центра охраны здоровья животных. – Владимир, 2005. – Т. 3. – С. 194–202.

4. Рамишвили, Л. Г. Серийное пассирование ротавируса крупного рогатого скота в гетерологичной культуре клеток / Л. Г. Рамишвили, Г. Г. Рухадзе, Е. А. Непоклонов // Вопросы вирусологии. – 1991. – № 6. – С. 521–523.

5. Сергеев, В. А. Ротавирусы. Вирусы и вирусные инфекции / В. А. Сергеев, Е. А. Непоклонов, Т. И. Алипер. – М. : Библионика, 2007. – С. 365–369.

6. Clark, B. Tripsin enhancement of rotavirus infectivity mechanisms of enhancement / B. Clark, J. R. Roth, M. L. Clark // J. Virol. – 1981. – V. 39. – P. 816–822.

7. Cell culture propogation of rotaviruses / L. J. Saif [et al.] // Tissue culture methods. – 1988. – V. 11, № 3. – P. 152–153.